[Resumo] Objetivo Determinar os 15 resíduos de aminoácidos N-terminais de duas subunidades semelhantes da Agacutina.As duas subunidades da molécula de enzima precisam ser divididas para obter a subunidade de cadeia peptídica única e sequenciada.Métodos A agacutina altamente purificada foi obtida por método bioquímico.Amostras de subunidades individuais para identificação e sequenciamento foram preparadas por separação por eletroforese SDS-PAGE, recuperação de fita adesiva de subunidade e tecnologia de eletrotransferência de membrana PVDF.Este último determinou 15 resíduos de aminoácidos no terminal N da subunidade pelo método de degradação de Edman.Resultados A sequência da subunidade grande (16 kDa) foi DCSSGWSSYEEHQYY e a da subunidade pequena (15 kDa) foi DSSGWSSYEGHEYYV.Conclusão Os resultados do sequenciamento mostraram que a Agacutin era uma nova enzima semelhante à trombina de veneno de cobra pesquisando o banco de dados do NCBI.
Horário da postagem: 22 de dezembro de 2022